最新切向流过滤集锦胞外囊泡纳米颗粒mA [复制链接]

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来自美国MayoClinic和德国海德堡大学的研究人员在年的《Small》杂志上发表了题为“Adipose-DerivedBiogenicNanoparticlesforSuppressionofInflammation”的文章。文中，使用KrosFlo?Research2i切向流过滤（TFF）系统分离纳米颗粒。简单来说，细胞培养基或含有脂质内容物的料液袋上清液先用孔径0.65μm的无菌聚醚砜中空纤维膜过滤。滤液再用MWCOkD的聚砜中空纤维膜过滤。最终的回流液以冻存用蔗糖缓冲液洗滤6倍，再浓缩至5-8mL。样品于-80℃冻存，以做进一步分析。

TFF操作使用特定孔径尺寸的膜，以实现基于粒径的纳米规模成分的浓缩和洗滤。液流沿膜表面切向流动，降低膜孔堵塞，获得相比传统死端过滤更高的分离效率。值得注意的是，TFF可非常高效地从更大（微米大小或以上）或更小（埃米大小）成分中分离纳米大小的成分。TFF的一个主要优势是可用于大体积（1L）生产规模料液的处理，而其它的分离技术，如体积排阻层析（SEC），通常限于处理更小的体积。TFF也可获得比超速离心等传统方法更高的批次间一致性。此外，之前针对细菌、支原体和内*素的标准检测实验证实，整个过程中可维持无菌性，这对于产品的临床转化来说是非常重要的一个方面。所以，相比其它方法，TFF更适合临床使用。

上图所示为从脂肪组织分离生物源性NP的主要步骤（M.Tian,etal.,）。

摘要：脂肪来源的间充质干细胞（ADSC）分泌的胞外囊泡（EV）对炎症性疾病有治疗作用。然而，以ADSC生产胞外囊泡成本较高、效率低且非常耗时。来源于脂肪的胞外囊泡和其它生物源性纳米颗粒的抗炎特性还没有被完全开发。在本研究中，生物源性纳米颗粒从抽吸的脂肪中直接获取，后者是生物材料一种容易获得且丰富的来源。相比ADSC-EV，抽吸脂来源纳米颗粒（Lipo-NP）的处理时间更短（小时vs.月）且生产成本更低（不需要临床级细胞培养设施）。实验评估了Lipo-NP的理化特性以及抗炎作用，并与患者匹配的ADSC-EV进行了比较。此外，实验将胍那苄载入Lipo-NP，以评估其对抗炎效应的增强作用。相比ADSC-EV，Lipo-NP中的载脂蛋白E和甘油脂质更为富集。此外，肝细胞和巨噬细胞对Lipo-NP的摄取更高。Lipo-NP和ADSC-EV具有相当的保护性和抗炎作用。特别是，Lipo-NP降低了巨噬细胞中，toll样受体4诱导的炎症因子的分泌。载胍那苄的Lipo-NP可进一步抑制炎症通路，说明这种联合治疗在炎症性疾病中有良好的应用前景。

原文：M.Tian,T.Ticer,Q.Wang,etal.,Adipose-DerivedBiogenicNanoparticlesforSuppressionofInflammation.Small,,